Жизненный цикл и диагностика токсоплазмоза
Toxoplasma gondii – это облигатный внутриклеточный кокцидийный простейший паразит типа Apicomplexa, вызывающий известное во всём мире заболевание Токсоплазмоз.
Домашние кошки и дикие кошачьи являются основными хозяевами токсоплазмы, другие виды теплокровных животных (включая человека и птиц) служат лишь промежуточными звеньями в передаче паразита.
Особенности жизненного цикла T. gondii
▪️ Токсоплазма имеет энтероэпителиальный жизненный цикл в своём окончательном хозяине и выделяется в виде ооцист с фекалиями. Это выделение длится 3–21 день (спорулирование ооцисты происходит в течение 1–5 дней после выделения из организма).
▪️ Тканевые формы паразита (тахизоиты и брадизоиты) обнаруживаются в тканях основного и промежуточного хозяина, а также в молоке кошачьих.
▪️ Существует три основных способа передачи T. gondii у всех видов хозяев: врождённое заражение, проглатывание инфицированных тканей и проглатывание заражённой ооцистами пищи или воды.
▪️ После проглатывания ооцист хозяином, T. gondii следует внекишечному жизненному циклу; тканевые цисты в основном образуются в ЦНС, мышцах и внутренних органах.
▪️ Паразитемия во время беременности хозяина может вызвать плацентит и распространение тахизоитов на плод, что может привести к аборту или врождённым нарушениям.
Диагностика
Окончательный диагноз клинического токсоплазмоза подтверждается только тогда, когда организм обнаруживается в жидкостях или тканях организма, но на практике многие случаи диагностируются «эмпирическим» путём сопоставления наличия антител, клинических признаков и ответа на терапию клиндамицином или комбинацией триметоприма и сульфонамида. Примерно в трети подтверждённых случаев токсоплазмоза у животных наблюдаются сопутствующие иммуносупрессивные состояния.
Обнаружение тканевых форм
Прижизненная диагностика клинического токсоплазмоза в идеале основана на обнаружении тахизоитов с помощью цитологии, иммуногистохимии, ПЦР или клеточной культуры. Обнаружение тахизоитов приводит к постановке окончательного диагноза: они могут быть обнаружены в различных тканях и жидкостях организма во время активной инфекции.
При цитологическом исследовании брадизоиты или тахизоиты T. gondii могут быть обнаружены в тканях, выпотах, жидкостях бронхоальвеолярного лаважа, водянистой влаге или спинномозговой жидкости, желчи (рис.1).
Рис.1. Аспират печени кошки: округлая группа овальных зоитов, соответствующая разорванной цисте Toxoplasma gondii с внутрикистозными брадизоитами (окраска по Райту, 1000x).
ДНК T. gondii может быть обнаружена в крови здоровых кошек и собак, поэтому положительные результаты ПЦР-исследования из данного типа материала не коррелируют с клиническим заболеванием.
У собак тахизоиты N. caninum невозможно отличить от тахизоитов T. gondii при цитологическом исследовании, поэтому для постановки окончательного диагноза необходимы дополнительные исследования.
Обнаружение ооцист
Выделение ооцист можно обнаружить с помощью микроскопии образцов кала и подтвердить с помощью ПЦР-исследования. Размер ооцист Toxoplasma gondii составляет 10 × 12 мкм. При их обнаружении в фекалиях кошек с диареей это предполагает заражение T. gondii, однако обнаружение ооцист имеет низкую прогностическую ценность для клинического токсоплазмоза, поскольку признаки, развивающиеся при диссеминированной инфекции, появляются после завершения выделения ооцист (рис. 2).
Рис.2. Ооцисты T.gondii в пробе, полученной методом флотации фекалий.
Методы флотации для обнаружения ооцист имеют преимущество в быстроте выполнения, однако недостатком является их низкая чувствительность – требуется более 1000 ооцист на 1 грамм фекалий для их обнаружения при микроскопии.
Кроме того, метод неспецифичен: ооцисты T. gondii морфологически неотличимы от ооцист Hammondia hammondi, Besnoitia orcytofelisi, Besnoitia darling и видов Neospora.
В одном исследовании ооцисты были обнаружены методом флотации в 105 из 18 259 образцов фекалий кошек, но только 46 из них были идентифицированы как ооцисты T. gondii (34 были ооцистами H. hammondi). Точный вид можно определить с помощью ПЦР-исследования.
Обнаружение антител
Тесты на антитела не очень полезны для подтверждения клинической картины токсоплазмоза – антитела к T. gondii обычно обнаруживаются как у здоровых, так и у больных кошек (в США 31,6% из 12 628 клинически больных кошек были серопозитивны по антителам к токсоплазме). Таким образом, их наличие не доказывает клинический токсоплазмоз, но указывает на то, что данное заболевание должно быть в списке дифференциальных диагнозов у кошки с похожими клиническими признаками.
Антитела класса IgM указывают на недавнюю инфекцию и иногда могут быть обнаружены у здоровых кошек. Очень высокие или растущие титры IgG или IgM, специфичные к T. gondii, вызывают подозрение на клинический токсоплазмоз.
Кошка с положительным результатом на антитела только с небольшой вероятностью будет выделять ооцисты – антителам требуется 2–3 недели для развития, и к этому времени выделение ооцист прекращается. Кошка также вряд ли будет выделять ооцисты в будущем, если она повторно подвергнется воздействию токсоплазм или будет находиться под иммунодепрессией.
Кошка с отрицательным результатом на антитела потенциально может выделять ооцисты (если выработка антител ещё не началась). Также выделение кошкой ооцист возможно в будущем, если она впервые подвергнется воздействию T. gondii.
Автор: Анна Черланова, ветеринарный врач отдела ПЦР лаборатории «ПОИСК»